Объективизация состояния лизосомальных мембран гепатоцитов с использованием нагрузочного теста в практике токсикологического эксперимента

Abstract

Изучение механизмов и фазности развития ответной реакции организма в токсикологических исследованиях требует использования адекватных моделей и тестов, которые можно применять при остром, подостром и хроническом токсикологическом эксперименте. При проведении токсикологических исследований установление предикторов декомпенсации является особенно важным с позиций регламентации временных и дозовых воздействий и разработки профилактических и лечебных мероприятий. Для решения вопроса об установлении зависимости «доза-концентрация-эффект» в действии токсикантов на клеточном уровне актуальным является изучение реакции мембранных систем клеточных органелл. Известен ряд веществ, обладающих гепатотоксичностью, с которыми человек на протяжении своей жизни сталкивается в окружающей среде. Повреждение и повышение проницаемости лизосомальных мембран гепатоцитов играет важную роль в патогенезе токсических поражений печени, вызванных ксенобиотиками. С целью выявления ранних признаков декомпенсации при токсических поражениях печени (хроническое токсическое поражение печени, вызванное четыреххлористым углеродом и внепеченочный холестаз) в условиях токсикологического эксперимента проведен анализ динамики неседиментируемой активности кислых нуклеаз в ткани печени под влиянием нарастающих концентраций неионного детергента. Проведение нагрузочного теста при моделируемой патологии позволяет объективизировать прочность связи гидролаз с мембраной лизосом; выявить ранние нарушения стабильности мембран органелл и предикторы истощения функциональных резервов и начало стадии декомпенсации.

In order to identify early signs of decompensation in toxic liver damage (chronic toxic liver damage caused by carbon tetrachloride, and extrahepatic cholestasis) during the toxicological experiment, the dynamics of the non-sedimented acid nuclease activity in the liver tissue was studied with the help of the test with the increasing concentrations of non-ionic detergent. It was established that the test with the increasing concentrations of Triton X-100 allows us to objectively assess the sensitivity of lysosomal membranes to these effects due to the demonstration of the extent of the association of acid nucleases with the organelles’ membrane. The universal early predictors of decompensation in case of chronic toxic liver damage were revealed at the sub cellular level. Comparative evaluation of test results at different stages of a toxicological experiment indicates a unidirectional, stage-dependent character of changes of the lysosomal membranes in both forms of models of the pathology.