Количественное определение суммы фенольных соединений и флавоноидов в листьях голубики высокорослой

Abstract

Цель – разработка методик количественного определения суммы фенольных соединений и флавоноидов в листьях голубики высокорослой. Материал и методы. Объектом исследования являлись высушенные и измельченные образцы листьев голубики высокорослой (Vaccinium corymbosum L.). Количественную оценку суммы ФС и флавоноидов в пересчете на гиперозид определяли спектрофотометрически с реактивом Folin – Ciocalteu (фосфорномолибденововольфрамовый реактив) и со спиртовым раствором алюминия хлорида соответственно. Измерения проводили в пяти независимых повторностях на одном образце сырья. Оптическую плотность измеряли на спектрофотометре Solar PB2201. Результаты. Подобраны оптимальные параметры экстракции суммы фенольных соединений и флавоноидов из листьев голубики высокорослой: экстрагент – 60% спирт этиловый, время экстракции – 50 минут, соотношение «сырье:экстрагент» – 1:100, степень измельченности – 355 мкм. Приведены оптимальные факторы протекания химических реакций взаимодействия ФС с реактивом Folin – Ciocalteu (время реакции –50 минут, концентрация карбоната натрия – 5%, количество добавляемого реактива – 0,5 мл), флавоноидов со спиртовым раствором алюминия хлорида (время реакции – 50 минут, объем реактива – 2 мл). Разработаны и валидированы методики количественного определения суммы фенольных соединений и флавоноидов в пересчете на гиперозид в листьях голубики высокорослой методом спектрофотометрии. Относительная ошибка при доверительной вероятности 95% количественного определения суммы фенольных соединений – 1,90%, суммы флавоноидов – 3,24%. Содержание суммы ФС в листьях голубики высокорослой составляло в среднем – 20,45%, флавоноидов – 1,93%. Заключение. Подобраны оптимальные условия экстракции суммы фенольных соединений и флавоноидов из листьев голубики высокорослой. Разработаны и валидированы методики количественного определения суммы фенольных соединений и флавоноидов в пересчете на гиперозид в листьях голубики высокорослой.

Material and methods. Dried and crushed highbush blueberry (Vaccinium corymbosum L.) leaf samples were used in the study. Total phenolic compounds and flavonoids, expressed as hyperoside, were determined spectrophotometrically using Folin - Ciocalteu (phosphomolybdenum tungsten reagent) and an alcoholic aluminum chloride solution, respectively. Measurements were performed in five independent replicates on a single raw material sample. Optical density was measured using a Solar PB2201 spectrophotometer. Results. The optimal parameters for the extraction of total phenolic compounds and flavonoids from highbush blueberry leaves were selected: extractant – 60% ethyl alcohol, extraction time – 50 minutes, raw “material:extractant” ratio – 1:100, grinding degree – 355 μm. The optimal factors for the chemical reactions of the interaction of phenolic compounds with the Folin-Ciocalteu reagent (reaction time – 50 minutes, sodium carbonate concentration – 5%, amount of added reagent – 0.5 ml), flavonoids with an alcoholic solution of aluminum chloride (reaction time – 50 minutes, reagent volume – 2 ml) are presented. Methods for the quantitative determination of the total phenolic compounds and flavonoids calculated as hyperoside in highbush blueberry leaves by spectrophotometry were developed and validated. The relative error at 95% confidence level for the quantitative determination of total phenolic compounds was 1.90%, and total flavonoids was 3.24%. The average phenolic content in highbush blueberry leaves was 20.45%, while the flavonoid content was 1.93%. Conclusion. Optimal conditions for extracting total phenolic compounds and flavonoids from highbush blueberry leaves were selected. Methods for quantitatively determining the total phenolic compounds and flavonoids expressed as hyperoside in highbush blueberry leaves were developed and validated.