Получение 6β-гидроксипроизводных анаболических стероидов с использованием рекомбинантной ферментативной системы CYP3A4 человека для целей допинг-контроля

Abstract

Реферат. Применение спортсменами анаболических андрогенных стероидов (ААС) является наиболее значимой проблемой допинг-контроля. ААС практически полностью метаболизируются в организме человека в результате фазы I и фазы II биотрансформации, в том числе при участии ферментов семейства цитохромов Р450 (CYP). Наличие стандартных веществ или сертифицированных референсных образцов метаболитов ААС является обязательным для определения спектра запрещенных препаратов в биологических жидкостях спортсменов. В рамках данной работы был разработан метод получения 6β-гидроксипроизводных значимых в допинг-контроле ААС с использованием рекомбинантной ферментативной системы CYP3A4 человека и подобраны условия для детекции синтетических ААС и их метаболитов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС).

The use of anabolic androgenic steroids (AAS) by athletes is the most significant problem in doping control. AAS are almost completely metabolized in the human body as a result of phase I and phase II biotransformation reactions, including the participation of cytochrome P450 (CYP) enzyme family. The presence of standard substances or certified AAS metabolites reference materials is obligatory for determining the spectrum of prohibited substances in the body fluids of athletes. Within the framework of this work, the method for the preparation of 6β-hydroxy derivatives of significant in doping control AAS was developed using human recombinant CYP3A4 enzyme system and parameters for synthetic AAS and their metabolites detection were selected using high-performance liquid chromatography mass spectrometry (HPLC-MS/MS).