Технологические аспекты клеточной терапии дендритными клетками рецидивов плоскоклеточного рака полости рта и ротоглотки

Abstract

Введение. Перспективным направлением лечения рецидивного рака слизистой оболочки полости рта и ротоглотки является терапия дендритными клетками. Цель исследования – разработать методику получения дендритных клеток с использованием в качестве праймирующего агента аутологичных опухолевых клеток в состоянии апоптоза для клеточной терапии рецидивов плоскоклеточного рака полости рта и ротоглотки. Объекты и методы. Для получения первичных клеточных культур плоскоклеточного рака использовали 54 образца опухолей языка и ротоглотки и их метастазов в лимфоузлы. Отличительной особенностью методики стало применение в качестве нагрузочного агента аутологичных опухолевых клеток ex vivo, и культур плоскоклеточного рака in vitro в состоянии индуцированного апоптоза. Результаты. Разработана оригинальная методика получения первичных клеточных культур плоскоклеточного рака. В ходе исследования решены проблемы контаминации опухолевых образцов и подавления роста фибробластов в клеточной культуре плоскоклеточного рака. Полученные культуры демонстрировали морфологию клеток плоскоклеточного рака. При иммунофенотипическом анализе активированные дендритные клетки экспрессировали маркеры CD80, CD83, CD86, молекулы хоуминга CD197, антиген-презентирующую молекулу HLA-DR. Отсутствовала экспрессия моноцитарно-макрофагальных маркеров CD14 и CD115. Заключение. Разработанная методика позволила изготовить индивидуальный биомедицинский клеточный продукт для клеточной терапии рака слизистой оболочки полости рта и ротоглотки.

Introduction. A promising area of treatment for recurrent oral and oropharyngeal cancer is dendritic cell therapy. The purpose of the study is to develop a technology for obtaining dendritic cells using autologous tumor cells in a state of apoptosis as a priming agent for cell therapy of recurrent squamous cell carcinoma of the oral cavity and oropharynx. Objects and methods. To obtain primary cell cultures of squamous cell carcinoma, 54 samples of tumors of the tongue and oropharynx and their metastases to the lymph nodes were used. A distinctive feature of the technique was the use of autologous tumor cells ex vivo and squamous cell carcinoma cultures in vitro in a state of induced apoptosis as a loading agent. Results. An original method for obtaining primary cell cultures of squamous cell carcinoma has been developed. The study solved the problems of contamination of tumor samples and suppression of fibroblast growth in squamous cell carcinoma cell culture. The resulting cultures demonstrated the morphology of squamous cell carcinoma cells. In immunophenotypic analysis, activated dendritic cells expressed markers CD80, CD83, CD86, homing molecules CD197, and the antigen-presenting molecule HLA-DR. There was no expression of monocyte-macrophage markers CD14 and CD115. Conclusion. The developed technique made it possible to produce an individual biomedical cell product for cell therapy of cancer of the oral mucosa and oropharynx.