Оптимизация условий высокоэффективной гель-хроматографии белково-пептидных компонентов плазмы на колонке Superdex 75 10/300 GL

Abstract

В статье приведены данные молекулярно-массового распределения белков и продуктов их деградации на колонке Superdex 75 10/300 GL, что является воспроизводимым экспресс-методом определения уровня пептидемии, обеспечивающим эффективное разделение плазмы на группы белково-пептидных компонентов. Получены данные высокоэффективного гель-хроматографического разделения 59 образцов нативной плазмы крови и супернатантов осажденной хлорной кислотой с последующей нейтрализацией. Установлен протокол предварительной подготовки плазмы к ВЭЖХ анализу с использованием кислотно-этанольного осаждения с последующей нейтрализацией 2М K2CO3. При одновременной регистрации при 4-х длинах волн (210, 220, 260, 280 нм) были определены времена удерживания среднемолекулярных пептидов в нативной плазме (33,72 мин), супернатанта в присутствии ацетатного буфера (33,82 мин) и в присутствии K2CO3 (33,81 мин) с определением точной молекулярной массы (2797,48; 2737,23 и 2743,19 Да соответственно).