Качественный анализ листьев валерианы методом тонкослойной хроматографии

Abstract

ВВЕДЕНИЕ. Препараты на основе корневищ и корней валерианы лекарственной (Valeriana officinalis L., сем. Valerianaceae) обладают седативным, антиаритмическим, спазмолитическим, противосудорожным, анксиолитическим действием и широко применяются при психоэмоциональных и когнитивных расстройствах, для лечения дисфункций вегетативной нервной системы, в том числе у детей, при климактерических расстройствах. Биологически активные соединения содержатся не только в подземных, но и в надземных органах растения. Это свидетельствует о целесообразности изучения качественного химического состава листьев валерианы лекарственной для оценки возможности использования в медицине, последующей стандартизации и разработки на их основе новых фитопрепаратов. ЦЕЛЬ. Сравнительный фитохимический анализ биологически активных веществ листьев и корневищ с корнями валерианы лекарственной методом тонкослойной хроматографии. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Объекты исследования: листья и корневища с корнями валерианы лекарственной, заготовленные в Минской обл. Республики Беларусь в августе 2023 г., высушенные методом воздушно-теневой сушки, измельченные до грубого порошка. Для обнаружения флавоноидов и фенолкарбоновых кислот использовали метод тонкослойной хроматографии на пластинках со слоем силикагеля (Sorbfil ПТСХ-АФ-А). Хроматографирование проводили в следующих подвижных фазах: этилацетат — муравьиная кислота безводная — вода (8:1:1 и 10:2:3), уксусная кислота 2 и 15%; в качестве растворов сравнения использовали 0,020% растворы рутина, кверцетина, хлорогеновой кислоты, кофейной кислоты в 96% этаноле. Для обнаружения сесквитерпеновых кислот хроматографирование осуществляли на пластинках со слоем силикагеля (Merck TLC Silica gel 60 F254) в следующих подвижных фазах: уксусная кислота ледяная — этилацетат — циклогексан (2:38:60), этилацетат — гексан (10:90), ацетон — гексан (1:2), гексан — этилацетат — уксусная кислота ледяная (65:35:0,5). В качестве растворов сравнения использовали 0,025% растворы валереновой кислоты, ацетоксивалереновой кислоты в 96% этаноле. РЕЗУЛЬТАТЫ. Подобраны условия проведения тонкослойной хроматографии, позволяющие разделить и идентифицировать химические компоненты листьев валерианы лекарственной, а также проведен сравнительный анализ с биологически активными веществами корневищ с корнями валерианы лекарственной. Установлено, что листья валерианы лекарственной содержат флавоноиды, дубильные вещества и сапонины, корневища с корнями — фенольные соединения, преимущественно дубильные вещества. Наилучшее разделение флавоноидов и фенолкарбоновых кислот достигнуто в системе растворителей «муравьиная кислота безводная — вода — этилацетат» (1:1:8). Установлено, что извлечения из листьев валерианы лекарственной содержат рутин и хлорогеновую кислоту, не содержат кверцетин и кофейную кислоту. Оптимальной подвижной фазой для разделения сесквитерпеновых кислот из листьев валерианы лекарственной является система «уксусная кислота ледяная — этилацетат — циклогексан» (2:38:60). ВЫВОДЫ. Установлено, что спиртовые извлечения корневищ с корнями и листьев валерианы лекарственной имеют схожий качественный состав флавоноидов, фенолкарбоновых и сесквитерпеновых кислот. Во всех образцах обнаружены рутин, хлорогеновая, валереновая и ацетоксивалереновая кислоты. Необходимо проведение дальнейших исследований для определения количественного содержания этих соединений и оценки целесообразности использования листьев валерианы в качестве источника для получения лекарственных растительных препаратов.

INTRODUCTION. Drugs based on rhizomes with roots of valerian (Valeriana officinalis L., family Valerianaceae) have sedative, antiarrhythmic, antispasmodic, anticonvulsant, anxiolytic effects and are widely used in psychoemotional and cognitive disorders, for the treatment of dysfunctions of the autonomic nervous system, including children, and for menopausal disorders. Biologically active compounds are contained not only in the underground, but also in the aboveground organs of the plant. This indicates the expediency of studying the qualitative chemical composition of valerian officinalis leaves to assess the possibility of use in medicine, subsequent standardisation and the development of new phytopreparations based on them. AIM. Comparative phytochemical analysis of biologically active substances of leaves and rhizomes with roots of Valeriana officinalis by thin-layer chromatography. MATERIALS AND METHODS. Objects of research: leaves and rhizomes with roots of valerian harvested in various districts of the Minsk region of the Republic of Belarus in August 2023, dried by air-shade drying, ground to a coarse powder. The method of thin-layer chromatography on plates with a layer of silica gel (Sorbfil PTX-AF-A) was used to detect flavonoids and phenolic carboxylic acids. Chromatography was performed in the following mobile phases: ethyl acetate — formic acid anhydrous — water (8:1:1 and 10:2:3), acetic acid 2 and 15%; 0.020% solutions of rutin, quercetin, chlorogenic acid, and caffeic acid in 96% ethanol were used as comparison solutions. To detect sesquiterpene acids, chromatography was performed on plates with a layer of silica gel (Merck TLC Silica gel 60 F254) in the following mobile phases: glacial acetic acid — ethyl acetate — cyclohexane (2:38:60), ethyl acetate — hexane (10:90), acetone — hexane (1:2), hexane — ethyl acetate-glacial acetic acid (65:35:0.5). 0.025% solutions of valerenic acid and acetoxyvaleric acid in 96% ethaol were used as comparison solutions. RESULTS. The conditions of thin-layer chromatography have been selected to separate and identify the chemical components of leaves of Valeriana officinalis, as well as a comparative analysis with biologically active substances of rhizomes with roots of V. officinalis. It was revealed that the leaves of . officinalis contain flavonoids, tannins and saponins, rhizomes with roots contain phenolic compounds, mainly tannins. The best separation of flavonoids and phenolic carboxylic acids was achieved in the solvent system formic acid anhydrous — water — ethyl acetate (1:1:8). It was found that extracts from the leaves of V. officinalis contain rutin and chlorogenic acid, do not contain quercetin and caffeic acid. The optimal mobile phase for the separation of sesquiterpenic acids from valerian leaf is the glacial acetic acid — ethyl acetate — cyclohexane (2:38:60) system. CONCLUSIONS. It has been established that alcoholic extracts of rhizomes with roots and leaves of valerian have a similar qualitative composition of flavonoids, phenolic carboxylic and sesquiterpenic acids. Rutin, chlorogenic, valerenic, and acetoxyvaleric acids were found in all samples. Thus, V. officinalis leaves can serve as a source of flavonoids, phenolic carboxylic and sesquiterpenic acids.