Морфофункциональные и иммунофенотипические характеристики фибробластов дермы человека под влиянием фитоэкстрактов растений рода Lamium

Abstract

Резюме. Цель исследования – определить максимально переносимые для фибробластов дермы человека концентрации Lamium album, Lamium purpureum и Lamium maculatum фитоэкстрактов , а также их влияние на морфофункциональные и иммунофенотипические характеристики клеток. Материал и методы. Исследование выполнено на культурах фибробластов дермы человека 3–5 пассажей. Экстракты растений рода вносили в культуры в концентрациях суммы фенольных соединений 0,25; 0,5 и 1,5 мкМ в пересчёте на хлорогеновую кислоту. Оценивали жизнеспособность клеток, формирование и морфологию монослоя, индекс пролиферации, экспрессию поверхностных и внутриклеточных маркеров методом проточной цитофлуориметрии. Стресс-индуцированное клеточное старение моделировали с использованием H2O2 ; активность β-галактозидазы определяли как маркер сенесценции. Статистическую обработку данных проводили с применением непараметрических тестов. Результаты. Экстракты Lamium album, Lamium purpureum и Lamium maculatum и в концентрациях 0,25–0,5 мкМ не оказывали цитотоксического действия: жизнеспособность фибробластов дермы человека сохранялась на уровне контроля, формирование плотного монослоя не нарушалось, индекс пролиферации не увеличивался. Иммунофенотип и морфология клеток соответствовали контрольным культурам. В концентрации 0,5 мкМ выявлено снижение продукции коллагена III типа и повышение синтеза фибронектина. Во всех исследованных группах отмечено снижение выраженности стресс-индуцированного клеточного старения. Повышение концентрации экстрактов до 1,5 мкМ сопровождалось снижением жизнеспособности и морфологическими признаками торможения пролиферации. Заключение. Фитоэкстракты Lamium album, Lamium purpureum, Lamium maculatum оказывают дозозависимое влияние на фибробласты дермы человека in vitro. Концентрации до 0,5 мкМ являются максимально переносимыми. Полученные данные свидетельствуют о клеточной безопасности экстрактов растений рода Lamium в указанном диапазоне концентраций и потенциальное антифибротическое действие при повышении концентрации до 1,5 мкМ.

Abstract. Objectives. To determine the maximally tolerated concentrations of Lamium album, Lamium purpureum, Lamium maculatum and phytoextracts for the human dermal fibroblasts, as well as their effects on the morphofunctional and immunophenotypic characteristics of the cells. Material and methods. The study was performed on the human dermal fibroblast cultures at passages 3–5. Hydroalcoholic extracts of Lamium plants were added to the cultures at concentrations of 0.25, 0.5, and 1.5 μM, calculated as chlorogenic acid. Cell viability, monolayer formation and morphology, proliferation index, and the expression of surface and intracellular markers were assessed using flow cytofluorimetry. Stress-induced cellular senescence was modeled using H2O2; acid β-galactosidase activity was determined as a senescence marker. Statistical data processing was performed using nonparametric tests. Results. Extracts of L.album, L.purpureum, and L.maculatum at concentrations of 0.25–0.5 μM did not exhibit a cytotoxic effect: dermal fibroblast viability remained at the control level, dense monolayer formation was not impaired, and the proliferation index remained unchanged. The immunophenotype of the cells matched that of the control cultures. At the concentration of 0.5 μM, a decrease in type III collagen production and an increase in fibronectin synthesis were observed (for and ). Reduction in the severity of stress-induced cellular senescence were observed in all studied groups. Increasing the extract concentration to 1.5 μM was accompanied by a decrease in viability and morphological signs of inhibited proliferation. Conclusions. Phytoextracts of Lamium album, Lamium purpureum, Lamium maculatum exert a dose-dependent effect on human dermal fibroblasts in vitro. Concentrations up to 0.5 μM are maximally tolerated. These data demonstrate the cellular safety of plant extracts in this concentration range and a potential antifibrotic effect when the concentration is increased to 1.5 μM.